|
Docente
|
MELINO SONIA MICHAELA
(programma)
Durante il coso saranno affrontati i seguenti argomenti:
➢ Caratteristiche generali delle Macromolecole Biologiche
➢ Sintesi e Degradazione delle proteine negli organismi eucariotici
➢ Struttura delle Proteine e Relazione Struttura/Funzione delle Proteine
➢ Meccanismi molecolari alla base della Trasduzione del segnale ormonale, dei Sistemi sensoriali e della Contrazione Muscolare
➢ Cenni sui meccanismi molecolari alla base della morte cellulare programmata e sui target terapeutici per le terapie antitumorali
➢ Cenni sulla replicazione virale e sulle proteine virali come target terapeutici
➢ Matrice extracellulare ed Ingegneria Tissutale
➢ Tecniche di base per lo studio delle proteine, degli acidi nucleici e delle loro interazioni.
Laboratorio
1. Esercitazione pratica: estrazione di DNA plasmidico da ceppi E.coli precedentemente trasformati al fine di ottenere l’amplificazione del gene di una proteina; determinazione della concentrazione del DNA ed analisi del DNA estratto mediante elettroforesi in gel di agarosio.
2. Esercitazione pratica: descrizione della procedura per la produzione dei proteine ricombinanti.
3. Esperienza sulle tecniche per la purificazione ed analisi delle proteine ricombinanti: cromatografia d’affinità ed elettroforesi in gel di poliacrilammide di proteine al fine di valutare l’espressione proteica dopo l’induzione, il grado di purezza del campione proteico dopo cromatografia di affinità e la determinazione del peso molecolare (SDS-PAGE).Western-blotting per l’analisi dell’espressione genica; spettrometria di massa.
4. Esercitazione pratica: basi di spettroscopia NMR per lo studio delle proteine marcate con isotopi stabili (15N, 13C, 2H).
5. Esercitazione pratica: preparazione di scaffold per l’ingegneria tissutale e medicina rigenerativa
 Lehnniger -Principi di Biochimica ; Branden–Tooze Introduzione alla struttura delle Proteine; Wilson- Metodologie Biochimiche
|
